1 范圍
本標準規(guī)定了出口糧谷中三環(huán)唑殘留量檢驗的抽樣、制樣和氣相色譜測定方法。
本標準適用于出口大米中三環(huán)唑殘留量的檢驗。
2 抽樣和制樣
2.1 檢驗批
以不超過4 000袋(200 t)為一檢驗批。
同一檢驗批的商品應具有相同的特征,如包裝、標記、產(chǎn)地、規(guī)格和等級等。
2.2 抽樣數(shù)量
按式(1)計算抽取袋數(shù):
式中:N—全批袋數(shù);
a—抽樣袋數(shù)。
注:a值取整數(shù),小數(shù)部分向前進位為整數(shù)。
2.3 抽樣工具
2.3.1 金屬單管取樣器:全長55 cm(包括手柄),直徑1.5~2.0 cm,溝槽長度應超過袋對角線長度的一半。
2.3.2 取樣鏟。
2.3.3 分樣板。
2.3.4 樣品筒(袋):可密封。
2.3.5 分樣布或適用鋪墊物。
2.4 抽樣方法
2.4.1 倒包抽樣:從堆垛的各部位隨機抽取2.2規(guī)褪的應抽樣件數(shù)的10%(每批一般不少于3袋),將袋口縫線全部拆開,平置于分樣布或其他潔凈的鋪墊物上,雙手緊握袋底兩角,提起約成45o傾角,倒拖約1m,使袋內(nèi)貨物全部倒出。檢查袋內(nèi)和袋間品質(zhì)是否均勻。確認情況正常后,用取樣鏟隨機在各部位抽取樣品,立即將樣品倒入盛樣器內(nèi)。每袋抽取的樣品量應基本一致。
2.4.2 袋內(nèi)抽樣:按2.2規(guī)定的應抽樣袋數(shù)的90%,在堆垛四周上、中、下各層以曲線形走向隨機抽取。將取樣器(2.3.1)管槽朝下,從每袋一角依斜對角方向插入袋內(nèi),然后將管槽旋轉(zhuǎn)朝上,抽出取樣器,立即將樣品倒入盛樣容器內(nèi)。每袋抽取的樣品量應與2.4.1基本一致。
每批樣品總量應不少于4 kg。
2.4.3 大樣縮分:集中袋內(nèi)和倒包抽樣所取全部樣品,倒于分樣布上,用分樣板按四分法縮分出樣品不少于2 kg,盛于樣品筒內(nèi),加封后標明標記并及時送交實驗室。
2.5 試樣制備
將樣品按四分法縮分至1 kg,全部磨碎并通過20目篩?;靹?,均分成兩份,分別裝入潔凈的容器內(nèi)作為試樣,密封,標明標記。
2.6 試樣保存
將試樣于-5℃以下避光保存。
注:在抽樣和制樣的操作過程中,必須防止樣品受到污染或發(fā)生殘留物含量的變化。
3 測定方法
3.1 方法提要
試樣中殘留的三環(huán)唑用丙酮振蕩提取,提取液經(jīng)濃縮后,過中性氧化鋁柱凈化,二氯甲烷-甲醇溶液洗脫。洗脫液經(jīng)濃縮、定容后,用配有氮磷檢測器的氣相色譜儀測定,外標法定量。如有必要,用色譜-質(zhì)譜檢測器法來確證。
3.2 試劑和材料
除另有規(guī)定外,所用試劑均為分析純,水為蒸餾水。
3.2.1 甲醇:重蒸餾。
3.2.2 二氯甲烷:重蒸餾。
3.2.3 丙酮:重蒸餾。
3.2.4 二氯甲烷-甲醇(99+1)溶液。
3.2.5 無水硫酸鈉:于650℃灼燒4h,貯于密封容器中備用。
3.2.6 中性氧化鋁:于650℃灼燒4 h,貯于密封容器中,使用前在130℃下烘2 h,貯于干燥器內(nèi)冷卻備用。
3.2.7 三環(huán)唑標準品:純度≥99%。
3.2.8 三環(huán)唑標準工作溶液:準確稱取適量的三環(huán)唑標準品,用丙酮配制成濃度為1.0 mg /mL的標準儲備液。再根據(jù)需要用丙酮稀釋儲備液,配成適當濃度的標準工作溶液。
3.3 儀器和設備
3.3.1 氣相色譜儀并配有氮磷檢測器和質(zhì)譜檢測器。
3.3.2 旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)器。
3.3.3 震蕩器。
3.3.4 中性氧化鋁柱:15cm×0.6cm(內(nèi)徑),帶有10 mL儲液斗,柱內(nèi)裝2g中性氧化鋁,上下各填0.5 cm高的無水硫酸鈉。
3.3.5 微量注射器:10 uL。
3.3.6 離心管:50 mL,具磨口塞。
3.4 測定步驟
3.4.1 提取
稱取約20 g試樣(精卻至0.1g),置于一250 mL錐形瓶中。加入50 mL丙酮,震蕩提取1h,將上清液濾入100 mL容量瓶中。殘渣再用50 mL丙酮提取一次。合并提取液于容量瓶中,并用丙酮定容至刻度。
準確移取10 mL提取液于一50 mL離心管中。于40℃水浴中,旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)至近干,加入2 mL二氯甲烷。
3.4.2 凈化
在中性氧化鋁柱中,加入10 mL二氯甲烷,調(diào)節(jié)流速約為1 mL/min。待液面降至無水硫酸鈉層時,將上述的濃縮液加入柱中。待液面降至無水硫酸鈉層時,用5 mL二氯甲烷洗滌器皿,加入柱內(nèi),繼用5 mL二氯甲烷淋洗,待液面降至無水硫酸鈉層時,棄去流出液。隨后立即用35 mL二氯甲烷-甲醇(99+1)溶液洗脫。收集35 mL洗脫液于50 mL離心管中,在40℃下旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)至干,準確加入1 mL丙酮以溶解殘渣。供氣相色譜測定。
3.4.3 測定
3.4.3.1 氣相色譜條件
a)色譜柱:HP-SMS, 30 m×0.25 mm(內(nèi)徑),膜厚0.25 um,或相當者;
b)載氣:氮氣,純度≥99.99%,1 mL/min;
c)輔助氣:氮氣,純度≥99.99%, 20 mL/min ;
d)氫氣:3.5 mL/min;
e)空氣:100 mL/min;
f)色譜柱溫度:215℃;
g)進樣口溫度:270℃;
h)檢測器溫度:320℃;
i)進樣量:1 uL;
J)進樣方式:無分流,1 min后開閥。
3.4.3.2 氣相色譜測定
根據(jù)樣液中被測農(nóng)藥含量情況,選定峰高相近的標準工作溶液。標準工作溶液和待測樣液中農(nóng)藥的響應值均應在儀器檢測的線性范圍內(nèi)。對標準工作液與樣液應等體積參插進樣測定。在上述色譜條件下,三環(huán)唑保留時間約為8.5 min。
3.4.4 氣相色譜-質(zhì)譜確證
3.4.4.1 氣相色譜-質(zhì)譜條件:
a)色譜柱:HP- 5MS, 30 m×0.25 mm(內(nèi)徑),膜厚0.25 um,或相當者;
b)載氣:氦氣,純度≥99.99%, 0.8 mL/min;
c)色譜柱溫度:50℃保持1 min,以10℃/min升溫至250℃,保持15 min;
d)進樣口溫度:270℃;
e)色譜一質(zhì)譜接口溫度:280℃;
f)進樣量:2 uL;
g)進樣方式:無分流,1 min后開閥;
h)電離能量:70 eV;
i)電離方式:El;
j)電子倍增器電壓:自動調(diào)諧值加200 V ;
k)測定方式:離子監(jiān)測方式;
1)監(jiān)測離子(m/z):189,162 amu;
m)溶劑延遲:5 min。
3.4.4.2 質(zhì)譜確證試驗
對標準溶液及樣液均按3.4.4.1規(guī)定的條件進行測定。如果樣液與標準溶液在相同保留時間有峰出現(xiàn),則用質(zhì)譜圖對其確證。在上述色譜條件下,三環(huán)唑保留時間約為29 min。
3.4.5空白試驗
除不稱取試樣外,均按上述測定步驟進行。
3.5結(jié)果計算和表述
用色譜數(shù)據(jù)處理機或按式(2)計算試樣中三環(huán)唑的殘留含量:
式中:X—試樣中三環(huán)唑殘留含量,mg/kg;
h—樣液中三環(huán)唑的峰高,mm;
hs—標準工作液中三環(huán)唑的峰高,mm;
c—標準工作液中三環(huán)唑的濃度,ug /mL ;
V—樣液終定容體積,mL ;
m—終樣液所代表的試樣量,g。
注:計算結(jié)果需將空白值扣除。
4 測定低限、回收率
4.1 測定低限
本方法測定低限為0.2 mg/kg。
4.2 回收率
大米中三環(huán)唑的添加濃度及其回收率的實驗數(shù)據(jù):
在0.20 mg /kg時,回收率為91.0%;
在2.0 mg/kg時,回收率為91.0%;
在5.0 mg/kg時,回收率為93.8%。