標(biāo)準(zhǔn)菌種使用注意事項(xiàng)： 1、標(biāo)準(zhǔn)菌種是不可以從冰箱中取出直接使用的，需在實(shí)驗(yàn)前進(jìn)行活化；
2、從標(biāo)準(zhǔn)菌株到實(shí)驗(yàn)使用的菌懸液的傳代次數(shù)應(yīng)不得超過(guò)5代，以防止過(guò)度的傳代增加菌種變異的風(fēng)險(xiǎn)。在2015版藥典“9203藥品微生物實(shí)驗(yàn)室質(zhì)量管理指導(dǎo)原則”中明確指出：任何形式的轉(zhuǎn)種均被認(rèn)為是傳代1次。
3、標(biāo)準(zhǔn)菌株復(fù)蘇后的一代，一般是不保存的，因?yàn)榫N剛剛從凍干粉的狀態(tài)復(fù)蘇，活性還未恢復(fù)到不錯(cuò)的狀態(tài)，再?gòu)?fù)壯而得的二代菌種，也就是標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備菌株，需進(jìn)行純度和特性的確認(rèn)，這個(gè)確認(rèn)記錄可證明在操作過(guò)程中，菌株未污染雜菌且活性與標(biāo)準(zhǔn)菌株一致。
4、保藏時(shí)應(yīng)選擇適宜的菌種保存方法，并注意標(biāo)示必須清晰明確。由于在試驗(yàn)過(guò)程中，實(shí)驗(yàn)菌種的活性和特性依賴(lài)于合適的試驗(yàn)操作和貯藏條件，大家也越來(lái)越重視實(shí)驗(yàn)菌種的狀態(tài)，如果保藏方法及管理不善，菌種優(yōu)良特性便會(huì)退化、喪失，甚至導(dǎo)致死亡，就會(huì)影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果。
標(biāo)準(zhǔn)菌種的保存使用
1、新引進(jìn)的菌種經(jīng)形態(tài)、染色、培養(yǎng)性狀、生化特性等的鑒別確定后作記錄，并進(jìn)行保存。
2、長(zhǎng)期保存的儲(chǔ)存菌株以冷凍干燥保藏為主，特殊要求的菌種可用其它方法進(jìn)行保存，保存期可長(zhǎng)達(dá)幾年至幾十年。
3、半儲(chǔ)存菌株以含20%甘油的肉湯或液體石臘封存的半固體瓊脂為主，在0℃以下保存，保存期為3－6個(gè)月。
4、應(yīng)用菌株以瓊脂斜面為主，在4℃保存，保存期為1－3個(gè)月。
5、菌種的傳代不可超過(guò)6次。視菌種的特性及使用情況，一般儲(chǔ)存菌株每5年傳記代一次，每1-2年從儲(chǔ)存菌株轉(zhuǎn)接至半儲(chǔ)存菌株，半儲(chǔ)存菌株每3-6個(gè)月傳代一次，每1-3個(gè)月從半儲(chǔ)存菌株轉(zhuǎn)接接至應(yīng)用菌株。
6、每次檢驗(yàn)用的菌株必須是從應(yīng)用菌株轉(zhuǎn)接的新鮮菌株。每支應(yīng)用菌株用兩次后必須銷(xiāo)毀（121℃，0.1MPa高壓滅菌處理15分鐘以上）。
7、各級(jí)保存的菌株應(yīng)有明確的編號(hào)、名稱(chēng)、傳代數(shù)、日期等到標(biāo)識(shí)。
8、菌種的收發(fā)、保存、使用、傳代等應(yīng)及時(shí)認(rèn)真詳細(xì)地登記，以備查核。
9、在保存過(guò)程中，如發(fā)生污染退化等問(wèn)題，應(yīng)及時(shí)報(bào)告，以便處理。
倍增時(shí)間不是代數(shù)，倍增時(shí)間是菌株特性，不同菌株起菌快慢不一樣，具體工藝需要結(jié)合倍增時(shí)間、培養(yǎng)基及生長(zhǎng)曲線等進(jìn)行設(shè)計(jì)
對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期細(xì)胞的生長(zhǎng)速率快速拉升，期間微生物的比生長(zhǎng)速率大，且菌體生長(zhǎng)不受基質(zhì)濃度限制，繁殖速率極快，細(xì)胞數(shù)量或質(zhì)量等生物量一般呈指數(shù)增長(zhǎng)，根據(jù)比生長(zhǎng)速率定義有：
μ=dCX/dt?1/CX
積分變形可得：
lnCX1=lnCX0+μ?t
繼續(xù)變形：
μ?t=（lnCX1－lnCX0）
則倍增時(shí)間td：
=lnCX1－lnCX0/μmax
=ln（2/1）/μmax
=0.693/μmax
其中：
μ：比生長(zhǎng)速率
CX0：起始菌體濃度（g/L）
CXt：經(jīng)過(guò)一段時(shí)間t后的菌體濃度（g/L）
CX：菌體濃度泛指（g/L）
td：菌體濃度增大一倍時(shí)所需要的時(shí)間min
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